超滤膜孔径和蛋白大小（超滤膜孔径）

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1、超滤膜孔径的测定微孔滤膜的孔径分离效率是关键所在，所以评价滤膜孔径甚为重要。

2、目前大致采用以下方法：一、直接测量法1.直接法测膜孔径（1）电子显微镜扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）电子显微镜表征膜的孔径、孔径分布及膜的形态结构。

3、制样至关重要。

4、湿膜样品要经过脱水、蒸镀、复型等处理。

5、逐级脱水法：膜样品用5%饿酸固定，然后在提取器中用CCl4或乙醇逐级脱水，再用环氧树脂包埋固化，最后用超薄切片机切成薄片。

6、适用透射电子显微镜的观察。

7、低温冷冻脱水法：膜样品放在液氮或其他低温介质中冷冻，使膜样品中的水急速冷冻为细小的结晶，然后在低温（至少低于-60°C）和低真空下，使冷冻的结晶逐级升华。

8、这样制备的膜样品不收缩，经镀金或复型，可用电子显微镜观测。

9、微滤膜的孔径为0.05-10m，扫描电镜可分辨。

10、超滤膜的孔径为1nm-30mm，扫描电镜的分辨率低于5-10nmnm，所以采用扫描电镜观测超滤膜的结构是困难的。

11、透射电镜的分辨率比扫描电镜要高得多，约为3-4A正确制样，高分辨率的透射电镜可以观测超滤膜的表面细微结构。

12、环境扫描电子显微镜（ESEM），克服了常规SEM的局限性。

13、使湿的、油性的、脏的和不导电的样品不经处理就可直接上机观测。

14、二、间接测量法间接法是利用与孔径有关的物理现象，通过实验测出相应的物理参数，在假设孔径为均匀直通圆孔的假设条件下，计算得到膜的等效孔径，主要方法有泡点压力法、压汞法、氮气吸附法、液液置换法、气体渗透法、截留分子量法、悬浮液过滤法。

15、泡点法：原理当气体通过充满了液体的膜孔时，若气体的压力与膜孔内液体的界面张力相等，则孔内的液体逸出，即得泡点压力与膜的孔径之间关系：泡点压力所对应膜的最大孔径。

16、实测时，膜应被液体完全润湿，否则将带来误差。

17、亲水性膜采用水为润湿液体；疏水性膜采用醇为润湿液体。

18、测定步骤a将样品平行于液面浸入蒸馏水中，使其完全湿润b将滤膜置于测试池上，压上光滑的多孔板c在多孔板上加入3-5mm深的水d开通气源，使压力缓慢上升，当滤膜表面出现第一个气泡并连续出泡时的气体压力值，带入公式可求出样品最大孔径值。

19、e气泡出现最多时的压力值，带入公式可求出样品最小孔径。

20、f由最大孔径与最小孔径即可算出平均孔径。

21、（1）电镜法比较直观，但属破坏性检测，也只能得到局部信息（2）泡压法（又称气体渗透法）只局限于测定膜孔中的最大孔径，用于小孔径超滤膜的测定时所需压力远高于膜的使用压力，故一般认为只适用于微滤膜的测定。

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